Pretende‐se que, no fim desta unidade curricular os alunos percebam em que consistem as estratégias que baseiam a tecnologia do DNA recombinante, quais são as ferramentas utilizadas na manipulação de genes; como esta tecnologia abrange múltiplos domínios das ciências da vida, e algumas das suas aplicações atuais. Pretende-se que os estudantes adquiram conhecimentos sobre algumas das tecnologias de recombinação que permitem a clonagem de genes, a construção de bibliotecas genómicas, o mapeamento e identificação de genes, a análise de expressão génica, a expressão heteróloga de genes e mutação dirigida.
‐Recombinação de DNA in vitro: enzimas de restrição e ligases; vectores de clonagem e clonagem de genes.
‐ Métodos para introdução de DNA recombinante em células e selecção de clones.
‐Construção de bibliotecas genómicas.
‐Expressão homóloga e heteróloga de genes: sistemas/vectores de expressão.
‐Análise do nível de expressão de genes.
‐Detecção e localização sub‐celular de proteínas codificadas por genes clonados: imunodetecção e fusões‐GFP.
‐ Mutagénese dirigida e engenharia de proteínas. Interrupção e eliminação de genes.
‐ Aplicações em Saúde e Biotecnologia.
As aulas integram a apresentação dos fundamentos teóricos incluídos no programa. Será seguida uma metodologia de exposição interativa estimulando a discussão dos temas apresentados. Serão apresentados exemplos e questões para discussão pelos estudantes, podendo ser utilizadas ferramentas bioinformáticas e com recurso a bases de dados. Sobre cada um dos tópicos da matéria apresentada será indicada bibliografia e páginas da net, onde os alunos poderão consolidar os temas abordados e aprofundar aspetos relacionados.
T.A. Brown, 2010. Gene cloning and DNA analysis : an introduction. 6ª ed. Wiley-Blackwell.
S.B. Primrose & R.M. Twyman. 2006. Principles of gene manipulation and genomics. 7ª ed. Blackwell Publishing.
Desmond S. T. Nicholl. 2008. An Introduction to Genetic Engineering. 3ª ed. Cambridge University Press.
Artigos científicos publicados em revistas internacionais.
http://www.hhmi.org/biointeractive/vlabs/transgenic_fly/index.html
Artigos científicos publicados em revistas internacionais.
0201498
2
